Bilisten körde enligt polisen på de två cyklisterna på väg 771 utanför Tystberga. Ambulanshelikopter kallades till platsen, och transporterade en av de skadade till sjukhus.
Den skadade är en man i 60-årsåldern, som enligt polisen var svårt skadad. Mannen fördes till Karolinska Universitetssjukhuset, och på tisdagseftermiddagen meddelade Region Stockholm att hans tillstånd är allvarligt men stabilt.
Den andra cyklisten är en kvinna i 60-årsåldern. Hon klarade sig ut skador.
Polisen uppger att man tog bilen i beslag för att genomföra en teknisk undersökning.
Vägen var delvis avstängd under räddningsarbetet, men hade öppnat igen runt 12-tiden på förmiddagen. Hastigheten på vägen där olyckan inträffade är 70 km i timmen.