Vad som med största sannolikhet var systrarnas sista dubbel i grand slam-sammanhang förlorades efter en jämn match på Arthur Ashe Stadium.
Men tjeckiskorna vann trots allt i två raka set: 7–6 (7–5), 6–4. När matchen var slut kramade Venus och Serena Williams om varandra och lämnade planen till stående ovationer.
– Jag är fortfarande chockad över att vi vann. Systrarna Williams är riktiga legendarer, säger Hradecka efter matchen.
Vanligtvis spelas inte första omgången av dubbelmatcherna på Arthur Ashe Stadium, men ett nu gjordes ett undantag för stjärnsystrarna som tillsammans har tagit 14 grand slam-titlar i dubbel. Däremot har de inte spelat tillsammans sedan de förlorade i Franska mästerskapens tredje runda för fyra år sedan.
Utsåld stadio
Detta var deras fjärde dubbelförlust i första omgången under en grand slam-turnering – sist det hände var i Franska mästerskapen 2013.
En utsåld stadion, med nära 24 000 personer på plats, följde matchen – precis som vid Serena Williams tidigare två matcher i veckan. Den 23-faldiga grand slam-vinnaren har signalerat att hon planerar att dra sig tillbaka från tennisen efter turneringen.
Storasyster Venus har nu spelat klart i US Open i år då hon förlorade mot belgiskan Alison Van Uytvanck i den första singelomgången.